Producción y caracterización de Anticuerpos Monoclonales específicos para ia Toxina del Vibrio cholerae 01. informe preliminar.

Resumen
El Vibrio cholerae es el agente causal de la enfermedad
del Cólera. El serotipo 01 puede ser subdividido en los
biotipos El Tor y Clásico. En el diagnóstico de la enfermedad
del Cólera se utilizan kits comerciales con el uso de
Anticuerpos Monoclonales (AM), éstos existen a nivel
mundial, pero el país no cuenta todavía con un centro de
elaboración y mantenimiento de producción deAM, por lo
que se propuso la creación de un Centro de Elaboración
de Anticuerpos Monoclonales. En este informé preliminar
mencionamos la producción y caracterización deAM contra
la toxina colérica (TC) para lo que se utilizó como antígeno
el extracto total del V. cholerae 01 (AC). La purificación
se realizó mediante cromatografía de afinidad
usando Proteína A-Sefarosa. Los AM se caracterizaron
por la prueba inmunoenzimática de ELISA usando la
Toxina del Cólera de procedencia comercial (TCc) y bacteria
sonicada como antígenos. El isotipo del AM obtenido
se realizó mediante inmunodifusión doble. La especificidad
se determinó mediante inmunotransferencia utilizando
como soporte antigénico bacterias enteropatógenas
más frecuentes en nuestro medio. Un total de 368
hibridomas se obtuvieron de los cuales 10 mostraron producción
de AM. Los hibridomas de mayor producción
fueron F53A9, F53F8, F57A5, F57F10, F59A1, F510F6,
F510G5 y F56F11. Seleccionándose, finalmente, el hibridoma
F56F11 por presentar el título más alto, correspondiendo
al isotipo lgG3. No observamos reacción cruzada
del AM obtenido con las demás bacterias enteropatógenas
investigadas mediante inmunotransferencia.
Estos resultados preliminares sustentan la posibilidad de
continuar hasta la obtención del kit comercial en la
identificación rápida de esta enfermedad.
Palabras clave: Vibrio cholerae, Toxina, Anticuerpos
Monoclonales.
Summary
Vibrio cholerae is the causative